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轉基因骨髓間充質干細胞結合支架修復退變椎間盤技術
編號:
名稱: 轉基因骨髓間充質干細胞結合支架修復退變椎間盤技術
領域: 生物醫用
成果形式:
投資額:
案例數: 2-5家
技術階段: 小批量階段
合作方式: 技術許可,其他

方案詳述

已成功構建Ad-GDF-5和Ad-GFP;已成功構建小腸粘膜下層和殼聚糖-聚己酸內酯支架;


目前已完成動物椎間盤退變模型的制作,間充質干細胞的提取,分離,培養和鑒定;


已制備轉基因MSCs,完成轉基因MSCs的細胞特性,其和支架之間的相互影響。

技術優勢

主要技術指標:



1)、重組腺病毒Ad-GDF-5以及對照空載腺病毒Ad-GFP制備的檢測采用PCR、熒光顯微鏡、western-blot方法;


(2)、采用相應物理化學工藝處理材料制備小腸粘膜下層和殼聚糖-聚己酸內酯支架,采用電子顯微鏡觀測;


(3)、間充質干細胞(MSCs)的采集,培養和鑒定,運用特定抗體采用流式細胞術鑒定;


(4)、用Ad-GDF-5和Ad-GFP分別轉染MSCs得到轉基因MSCs,熒光顯微鏡、熒光計數器及western-blot檢測轉染情況;


(5)、轉基因的MSCs復合支架的體外培養,電子顯微鏡、DNA含量檢測等方法研究細胞支架復合情況;


(6)、構建動物退變椎間盤模型,大體及切片染色檢測退變情況;


(7)、體內試驗部分主要通過大體觀察、組織切片、原位免疫熒光、western-blot等方法檢測。




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